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饲料中黄曲霉素的含量检测

小编 / 2022-07-22 13:44

  鱼饲料是鱼类生产成本的最大来源,因此极大地影响了养鱼业的经济回报。此外,鱼饲料的营养和质量直接影响着鱼的健康和生产力。 饲料质量取决于几个因素,例如所用的原料,加工条件,营养价值和饲料管理规范等。低质量的饲料成分和管理办法(如储存不佳)会使鱼饲料容易受到黄曲霉素的污染。


  黄曲霉素是一种高毒性,致癌的真菌次生代谢产物,主要由曲霉菌种产生。这些真菌常见于大多数土壤中,它们会入侵谷物和其他饲料生产所需要的农产品中,在田间(收获前)或储存期间(收获后)生长,并在条件有利时产生黄曲霉毒素。在大多数植物性食品/饲料中,曲霉菌在土壤中无处不在,因此无法完全消除它们的侵袭和随后产生的黄曲霉素。受黄曲霉素污染影响最大的农作物有玉米,花生和棉花,但储存的任何饲料作物都易受到影响。 因此,在动物饲料(包括鱼饲料)中使用谷物,油料种子,花生和棉花种子的产品可能会使动物容易接触黄曲霉素,并对健康产生不利影响。研究表明,黄曲霉素污染鱼饲料会引起不利的健康影响,例如生长速度慢,肉眼可见和显微镜下观察的损伤。 由此造成的养殖产量低,发病率,死亡率和鱼的品质差而导致很大的经济损失。高度黄曲霉素污染的饲料会导致鱼类急性中毒,其特征是腮色苍白,血液凝结受损,贫血,生长速度慢和死亡。长期摄入较低浓度导的黄曲霉素导致鱼类的肝脏和肾脏中出现肿瘤。


  饲料中的黄曲霉素污染是一个世界性的问题。 据报道肯尼亚维多利亚湖地区的鱼饲料中黄曲霉毒素的发生率为64.3%,其含量高达806.9 g / kg。 因此,对该区域的鱼饲料中黄曲霉素的含量,水平及其对鱼类的潜在影响知之甚少。本研究的目的是明确鱼饲料中黄曲霉素的存在和水平,以及分析饲料中黄曲霉素是否对肯尼亚养殖鱼类的健康产生不利影响。


  从养鱼场和鱼饲料生产厂家共收集了81种鱼饲料样品,利用ELISA检测发现,68份饲料中(84.0%)的黄曲霉素呈阳性,浓度范围:(ELISA)试剂盒的检测限1.8 g / kg~39.7 g / kg;而13个样品(16.0%)的黄曲霉素水平低于1.8g / kg。 黄曲霉素的平均总含量为7.0±8.3μg/ kg,中等水平为3.6μg/ kg。 使用液相色谱-高分辨率质谱(LC-HRMS/ MS)进一步分析表明,鱼饲料中存在黄曲霉素B1和G1,未发现 黄曲霉素B2和G2。五种纯饲料和九种复合饲料中黄曲霉素的含量均超过10 g / kg, 共有15(18.5%)个样品的黄曲霉素水平高于肯尼亚标准局(KEBS)和欧盟委员会设定的最大限量。


  Mann-Whitney测试表明,罗非鱼饲料中黄曲霉素含量明显高于虹鳟饲料的(如下图示)。在Fisher检验中,发现饲养的鱼与饲料类型(p <0.01),饲料组(p <0.01),饲料形式(p <0.01)和饲料来源有密切关系(p <0.01)。 黄曲霉素总含量高于最大限量的所有样品均为罗非鱼饲料,占所有检测罗非鱼饲料的30.6%。


  Mann-Whitney测试表明,自制饲料中黄曲霉素的总水平显著高于商业饲料(p = 0.05)(如下图示)。在黄曲霉素含量高于最大限量的15个样品中,有11个(73.3%)是自制的,占所有自制饲料的36.7%。


  如下表所示,对55种(67.9%)鱼饲料的成分进行了分析,其中46种饲料(83.6%)包含谷物碾磨副产品; 23种(41.8%)含有动物蛋白; 10种(18.2%)包含油籽饼或粗粉,其中7种(12.7%)包含谷物。四个成分组的饲料中黄曲霉素水平没有显著差异。


  通过走访有22个养鱼场,发现分别有31.8%,9.1%,45.5%和36.4%的鱼类出现死亡,食欲不佳,生长速度较差和肿瘤样病变的现象(下表示)。 Fisher检验表明,虹鳟鱼养殖场报告其鱼类(87.5%)比罗非鱼养殖场(7.1%)的发病情况更高(p <0.001)的发生。然而,两种养殖场的死亡率,饲料采食量和生长速度的报告没有显著差异。


  通过对120条鱼(80条虹鳟,40条罗非鱼)进行抽样检查,肉眼观察及显微镜检发现, 虹鳟鱼(57.5%)显示出比罗非鱼鱼(5.4%)明显更多(p <0.001)的损伤。 镜检发现虹鳟腹部出现腹水肿胀(46.3%),肝脏明显肿大(60.0%),有单个或多个发白色或黄色结节或囊性肿胀(50.0%)(图5)。鳟鱼肝脏大部分区域坏死(61.3%)和出血(91.3%)。 还观察到肌肉出血(30.0%),心脏(40.0%)和肾脏肿大(56.3%)。 虹鳟鱼(50.8%)显示出比罗非鱼(5.9%)明显更多(p <0.001)的损伤症状。


  对超过45.0%的鳟鱼肝脏进行组织学检查,发现不同程度的颜色加深,增大,嗜碱性肝细胞的不规则分布,细胞核较大,核仁突出。这些症状通常与黄曲霉毒素接触有关。 虹鳟鱼(66.5%)表现出比罗非鱼(4.6%)更多的微观病变。


  综上,肯尼亚Nyeri地区使用的鱼饲料被黄曲霉素污染严重,该地区的虹鳟显示出黄曲霉素诱发的典型病变,表明他们可能在某个时刻受到黄曲霉素的影响。采样的饲料中黄曲霉毒素的含量和水平表明,控制曲霉真菌和黄曲霉素对饲料和饲料成分的入侵是一个主要问题。因此需要重点监测鱼饲料的成分,来源,生产,储存等环节,以确保鱼饲料中的黄曲霉毒素水平低于最大限量,从而确保鱼和副产品对人类食用安全的影响。