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阿维菌素类药物残留测定方法(四)

[db:作者] / 2022-12-26 00:00

(5)免疫分析法(immunoassay,IA)

  

IA与仪器方法不同,它具有高度的选择性和灵敏度,可使分析过程简化,适合复杂基质中痕量组分的分析,它的基本原理是利用抗原-抗体的特异性反应,AVMs分析中主要有酶联免疫分析法(ELISA)、免疫传感器法(immunosensor)等。

  

Schmidt等制备了抗IVM的单克隆抗体,可以同时识别IVM和AVM,标准曲线的50%抑制率时的待测物浓度IC50分别为3μg/kg和7ug/kg,然而该抗体并没有作进一步的研究。Crooks等用结构改造后的IVM免疫兔子,制备了抗IVM的多克隆抗体,并以此建立了竞争ELISA方法,用于牛肝样品中IVM的检测。该方法LOD为1.6ng/g,批内和批间RSD分别为8.8%和14.6%。该ELISA方法与HPLC分析结果高度符合(r=0.99)。杨君宏等建立了一种间接竞争ELISA方法,检测牛组织中的AVMs残留。该方法可同时检测牛肝脏和肌肉中的AVM、IVM和EPR残留。该方法IC50为4.8ng/mL,线性范围为1.1~21.9ng/mL;以20ng/mL、50ng/mL和100ng/g浓度添加时,回收率为53.8%~80.4%,CV为3.4%~17.9%;以5ng/mL、10ng/mL和20ng/g浓度添加时,回收率为70.9%~108.6%,CV为3.7%~17.1%。

  

Samsonova等利用IVM的单克隆抗体研制了基于表面等离子体共振(SPR)的光学生物传感器,并用于牛奶中IVM的检测。样品用乙腈提取后,经C8柱净化后,用该免疫传感器检测。该方法LOD为16.2ng/mL;在100和50ng/mL添加浓度的回收率分别为102.6%和103%。McGarrity等研发了一种基于竞争性化学发光免疫分析的生物芯片,并用于EPR、AVM、IVM和DOR等的筛查。该芯片固体支持物和容器是包含离散测试位点的生物芯片阵列,点样后可用半自动的台式分析仪检测。牛奶中该方法的LOD为0.3~2ppb,组织为0.15~6.5ppb;回收率在71%~135%之间。

  

 

  

 

  

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