20.2.1.6 测定

(1)液相色谱条件

色谱柱：BEH C18(50mm×2.1mm，1.7um)或相当者；柱温：40℃；进样量：5.0uL；流动相：流动相A：甲醇，流动相B：水系流动相。洗脱程序及流速见表20-3。

表20-3流动相梯度程序及流速

(2)串联质谱条件

离子源：电喷雾离子源；扫描方式：正离子扫描；检测方式：多反应监测；毛细管电压：2.8kV；离子源温度：110℃；去溶剂气温度：380℃；去溶剂气(氮气)流量：600L/h；锥孔气(氮气)流量：50L/h；碰撞气流量：0.1L/h；锥孔电压、碰撞能量和驻留时间等质谱参数及母离子和子离子见表20-4。

表20-4 六种聚醚类抗生素的质谱参数和保留时间

(3)定性测定

样品溶液按照液相色谱-串接质谱分析条件进行测定时，如果检出的质量色谱峰保留时间与基质标准溶液中对应物质的保留时间一致，并且在扣除背景后的样品质谱图中，子离子的相对丰度与浓度接近的、相同条件下所得到的基质标准溶液谱图相比，误差不超过表1-5规定的范围，则可以判断样品中存在对应的被测物质。

(4) 定量测定

根据样品中被测物质的含量情况,选取峰面积相近的标准工作溶液-起进行液相色谱-串接质谱分析。标准工作溶液和待测样液中聚醚类抗生素的响应值均应在检测的线性范围内。对标准工作溶液和待测样液等体积参插进样测定。在上述液相色谱-串接质谱分析条件下，6种被测物质的保留时间见表20-4。其标准品的多反应离子监测色谱图见图20-1至图20-6。

图20-1 莫能菌素标准物质反应监测(MRM)色谱图

图20-2 马杜霉素标准品物质的多反应监测(MRM)色谱图

图20-3 拉沙洛菌素标准物质的多反应监测(MRM)色谱图

图20-4 盐霉素标准物质的多反应监测(MRM)色谱图

图20-5 尼日利亚菌素标准物质的多反应监测(MRM)色谱图

图20-6 甲基盐霉素标准物质的多反应监测(MRM)色谱图