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吡唑酮类药残留分析技术前处理——提取方法(二)

[db:作者] / 2022-12-20 00:00

B.酸性药物

  

a.中性提取

  

保泰松和羟布宗极性较低,采用有机溶剂直接提取的报道较多。有机溶剂提取药物的同时,也可以起到脱蛋白的作用。

  

Marti等采用乙腈提取血浆中保泰松,上清液直接进 HPLC分析。以倍他米松做内标,回收率为83%,LOD 和LOQ分别为0.016 μg/mL和0.029 μg/mL。

  

Dowling等用乙腈提取牛奶中保泰松等药物残留,乙腈提取液吹干后复溶于正已烷,气相色谱-串联质谱(GC-MS/MS)测定。保泰松的CCa为0.70ng/mL,CCβ为1.19ng/mL,回收率为104%~112%,CV小于8%。Dubreil-Cheneau 等用甲醇同时提取牛奶中保泰松和羟布宗等药物,提取液蒸干后复溶于1 mmol/L乙酸水溶液-乙腈(8+2,v/v),进LC-MSMS分析。方法回收率为94.7%~110.0%,CV为2.9%~14.7%,CCa为0.10ng/mL。Jedziniak等测定牛奶中保泰松和羟布宗,10mL牛奶中加入2g乙酸铵,10mL乙腈提取,提取液直接LC-MS/MS测定,CV为7%~28%,回收率为71%~116%。乙酸铵的盐析作用提高了提取效率,促进离心分层。实验发现,使用乙酸铵盐析比氯化钠更合理,因为使用氯化钠盐析时,质谱测定时微量氯化钠会形成[M+Na]+,抑制[M+H]+,使检测灵敏度降低;此外,氯化钠不挥发造成质谱离子源污染。

  

庞国芳等测定牛、猪、羊、鸡肌肉中保泰松残留,采用甲醇-0.25mg/mL二硫苏糖醇的乙酸乙酯溶液(1+7,v/v)提取,二硫苏糖醇起稳定剂作用,提取液经固相萃取净化后用HPLC-紫外检测器测定。方法回收率为89.0%~111.49%,RSD在8%以内,LOD为5.0mg/kg。

  

b. 酸性提取

  

保泰松和羟布宗显酸性,样品酸化后更易被萃取至水不互溶的有机溶剂中。

  

Marunaka等测定血液和尿液中的保泰松、羟布宗。以γ-羟基保泰松为内标,样品先用盐酸酸化,用苯-环已烷(1+1,v/v)萃取,萃取液吹干复溶于甲醇,进HPLC测定。保泰松、羟布宗和γ-羟基保泰松的LOD均为0.05μg/mL,保泰松、羟布宗回收率分别为96.7%±1.7%和93.1%±3.7%。Singh等测定血浆中保泰松、羟布宗等7种非甾体类抗炎药物,盐酸酸化后样品后用二氯甲烷提取,提取液吹干后复溶于流动相,HPLC测定。方法回收率为95%,LOD为50~250ng/mL。Gonzalez等测定尿液和血浆中保泰松和羟布宗等17种非甾体类抗炎药物,样品用1mol/L盐酸调节pH2~3,用二乙基醚提取,离心,取有机层,加入饱和碳酸氢钠溶液,液液分配净化水性杂质,取有机层蒸干后气相色谱-质谱(GC-MS)测定。血浆和尿液样品中保泰松和羟布宗的回收率为41%~68%,LOD分别为25ng/mL和10ng/mL。Simmons等用三氯乙酸提取血清中保泰松和羟布宗,提取同时也脱蛋白净化,提取液直接进超临界流体色谱(SFC)测定。方法LOD为0.1μg/mL(保泰松)和1.0μg/mL(羟布宗),CV为0.24%~4.94%,回收率为82%~83%。

  

2)超声辅助萃取(ultrasonic assisted extraction,UAE)

  

超声萃取利用超声波传递过程中存在着的正负压强交变周期,使提取溶剂和样品之间产生声波空化作用,溶液内气泡的形成、增长和爆破压缩,使固体样品分散,增大样品与萃取溶剂之间的接触面积,提高目标物从固相转移到液相。Gentili等测定牛奶和牛肉中包括保泰松在内的15种非甾体类抗炎药物。牛奶样品用10mL乙腈超声波提取10min,提取液离心后,氮气浓缩至5mL;牛肉样品依次用乙腈和丙酮提取,合并提取液浓缩至5mL。再0℃离心,除去下层脂肪,用OasisHLB柱净化,LC-MS/MS测定。牛奶和牛肉中保泰松的CCa分别为0.71ug/kg和0.92ug/kg,CCβ分别为1.23ug/kg和1.84μg/kg;回收率在97%~9%之间,CV小于12%。

  

3)分子滤过提取(molecular ultrafiltration extraction)

  

分子滤过提取是应用半透膜,根据样品中各物质分子量大小进行滤过而达到提取净化的目的,滤去液体样品中分子量较大的蛋白、氨基酸等杂质,而药物因为分子量较小,能透过滤膜而得到净化。De Veaul测定牛血浆中游离的保泰松,经过分子滤过膜滤去血浆中分子量大于10000的杂质后,超滤离心液进HPLC测定。方法回收率为91%~93%,CV为1%~4%,LOQ为2μg/mL。

  

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