全国服务热线:185-0176-3637
产品分类导航:
当前位置: 主页 > 企业动态 > 技术资料

磺胺类药物残留测定方法(二)

[db:作者] / 2022-12-08 00:00

2)荧光检测器(FLD)

  

FLD选择性强、灵敏度高,用于SAs的残留分析,样品的净化要求可以相对降低。但是SAs本身没有或只有较弱的荧光,不能直接用FLD检测,可以利用SAs结构中的氨基,通过柱前或柱后衍生,生成强荧光物质后进行检测。SAs常用衍生化试剂主要是荧光胺,激发波长通常为405~420nm,发射波长为485~495nm。

  

Costi等报道了采用HPLC-FLD测定动物肌肉中8种SAs的残留检测方法。样品采用超分子溶剂微萃取提取后,用荧光胺进行原位衍生,再用HPLC-FLD测定。方法回收率在98%~109%之间,重复性为1.8%~3.6%,重现性为3.3%~6.1%,LOQ为12~44ug/kg。苏敏等建立了动物肝脏中常见的10种SAs残留量的HPLC-FLD同时测定方法。样品用无水硫酸钠和乙腈提取,荧光胺柱前衍生化,用HPLC-FLD测定,外标法定量。RP18色谱柱分离,柱温55℃,进样量50uL,流动相为乙腈及0.01mol/L磷酸二氢钾溶液,洗脱梯度,激发波长405nm,发射波长495nm。方法线性相关系数r>0.999:LOD为2~10ug/kg;在5~100ug/kg添加水平范围内,平均回收率为70.6%~90.2%,RSD为4.1%~7.6%。Stoev等建立了肉和肾脏中10种常用SAs的HPLC-FLD定量分析方法。用乙酸乙酯和丙酮提取,经LLP净化后,进HPLC测定。方法LOQ为0.5~1ug/kg;在1ug/kg、5 ug/kg、10ug/kg添加浓度,方法平均回收率分别为64%、68%和75%。Salisbury等建立了肌肉、肝脏和肾脏中8种SAs的HPLC-FLD测定方法。样品提取物用pH3.0的缓冲液-乙腈(60+40,v/v)复溶,过滤后置入自动进样器中,程序进样,荧光胺柱前衍生,C18色谱柱分离,流动相为0.02mol/L磷酸-乙腈(60.5+39.5,v/v),FLD激发波长405nm,发射波长495nm,内标法定量。在0.05~0.2ug/g添加浓度,方法回收率为96%~99%,CV为4%~10%;LOD在0.01~0.015ug/g之间。Zotou等采用HPLC-FLD检测禽肉和蛋中的12种SAs。样品用乙腈和浓磷酸提取,经LLP和SPE净化后,用荧光胺衍生化,再进HPLC-FLD测定。用RP-18色谱柱分离,甲醇-0.05mol/L乙酸缓冲液(pH3.4)梯度洗脱。该方法在3.0~300ug/L范围线性良好;肉的LOD为2~17ug/kg,平均回收率在96.9%~108.6%之间:蛋的LOD为2~15ug/kg,平均回收率在96.0%~108.4%之间。Bermal等开发了检测蜂蜜中13种SAs的HPLC-FLD分析方法。样品用甲醇提取,HPLC梯度洗脱,用荧光胺在线柱前衍生化后,FLD测定。方法回收率在56%~96%,RSD低于10%,LOQ在4~15ng/g之间。

  

Maudens等采用HPLC-FLD检测了蜂蜜中的12种SAs。样品经酸水解,再采用LLP和强阳离子交换SPE柱净化,HPLC-FLD柱后衍生化测定。该方法LOD为1~2ng/g,LOQ为2~5ng/g,线性系数R2大于0.997。Gehring等8]也建立了能鱼、虾和蛙鱼组织中14种SAs的柱后衍生HPLC-FLD检测方法。